Как проводится анализ на Хеликобактер

Как проводится анализ на Хеликобактер

Анализ на Хеликобактер – это единственный достоверный способ определить наличие бактерии Helicobacter pylori, которая провоцирует развитие воспалительного процесса в желудке и двенадцатиперстной кишке. Учёными давно уже доказана связь этого условно-патогенного микроба с язвенной болезнью пищеварительного тракта. Поэтому лечение язвы и других заболеваний органов пищеварительной системы не будет эффективным без эрредикации хеликобактера.

Что это за патоген

Ранее болезни желудочно-кишечного тракта воспалительного генеза связывались со злоупотреблением острой пищей, повышенной кислотностью и пребыванием в ситуациях стресса. Эта доктрина была опровергнута относительно недавно – в 2005 году. Учёные Барри Маршалл и Робби Уоррен доказали главенствующую роль бактерии Helicobacter pylori в развитии язвенной болезни желудка, за что были удостоены Нобелевской премии в медицине.

Helicobacter pylori представляет собой спиралевидную бациллу со жгутиками, устойчивую к кислотам и не окрашивающуюся по Грамму. Местом обитания патогена считается слизистая пищеварительного тракта, а выявить микроб можно в слюне, кале, желудочном соке и зубном налёте. Благодаря жгутикам этот микроб обладает высокой подвижностью, поэтому он легко передвигается по всей пищеварительной трубке. Патогенность хеликобактера заключается в его способности выделять токсины, которые пагубно воздействуют на слизистую пищеварительного тракта, провоцируя язвенную болезнь и гастрит. Помимо этого, патоген может привести к раковой мутации клеток.

Helicobacter pylori

Половина жителей нашей страны инфицируется хеликобактером до 40 лет. По разным данным, заражены от 70 до 90 % граждан Российской Федерации. Это намного больше, чем в странах Европы и США. Такая статистика объясняется относительно низким уровнем жизни населения, что выражается в пренебрежении элементарными правилами гигиены и проживании в ненадлежащих санитарных условиях. Показателен и процент инфицированных в Москве – самом развитом мегаполисе России. Он составляет всего 60 %.

Заразиться патогеном можно следующим образом:

  • через столовые приборы и посуду;
  • через средства личной гигиены;
  • при поцелуях через слюну.

Во избежание инфицирования надо соблюдать такие профилактические меры:

  • мыть руки перед едой;
  • не пользоваться чужой посудой;
  • не откусывать от чужого фрукта, кусочка хлеба или другого цельного продукта;
  • не пользоваться чужой зубной щёткой;
  • не целоваться с малознакомыми людьми.

Этим правилам нужно научить ребёнка как можно раньше.

У большинства пациентов хеликобактер персистирует практически бессимптомно. Иногда носители микроба могут жаловаться на дискомфорт в эпигастрии и общее недомогание. Яркая клиническая картина заболеваний, вызванных этим патогеном, развивается на фоне неправильного питания, стрессов и несоблюдения правил личной гигиены.

Показания и противопоказания к проведению исследования

Врач-гастроэнтеролог назначает диагностические тесты на хеликобактер пациентам, у которых присутствуют следующие симптомы:

  • голодные боли в эпигастрии, проходящие после приёма пищи, или, наоборот, боли в животе после еды;
  • постоянная изжога и отрыжка кислым;
  • затруднение при проглатывании пищи;
  • непереносимость мясной пищи;
  • дискомфорт и чувство тяжести в желудке;
  • примесь слизи или крови в фекалиях;
  • ухудшение аппетита;
  • снижение массы тела;
  • вздутие живота, метеоризм, урчание в области брюшины;
  • тошнота, иногда с рвотой. В отделяемом могут присутствовать сгустки крови;
  • нарушение стула – диарея или запоры, продолжающиеся более двух дней.

Нарушение стула

Перечисленные симптомы сигнализируют о заболевании пищеварительной системы, причиной которого может быть хеликобактер.

Методика анализа крови и расшифровка показателей

Для диагностики хеликобактерной инфекции используют широкий спектр анализов. Материалами для исследований чаще всего бывают сыворотка крови и кал.

В крови бактерию обнаруживают следующими способами:

  • иммунологическим (ИФА, Вестерн-блот);
  • серологическим.

Как сдать анализ крови на Хеликобактер пилори

К тесту на хеликобактер необходимо подготовится заранее, чтобы избежать недостоверного результата. Правильный подготовительный период заключается в соблюдении следующих принципов:

  • за день до анализа ограничить физические и умственные нагрузки;
  • за два дня до забора материала исключить из рациона жареные и жирные блюда, а также отказаться от употребления спиртных напитков;
  • анализ сдается натощак, поэтому утром перед забором крови нельзя кушать, разрешается только пить несладкую воду без газа.

Для исследования используют венозную кровь, которую набирают из локтевой вены. После забора материала место укола заклеивают пластырем и просят подержать немного конечность согнутой в локтевом суставе.

Специфика ИФА

Принцип иммуноферментного анализа в том, что во время теста становятся видимыми антитела к хеликобактеру, которые формируются в ответ на его присутствие в организме. Для этого сыворотку крови пациента соединяют в планшетке с очищенными антигенами микроба. Если в крови имеются антитела к возбудителю, то происходит их соединение с антигенами, в результате чего высвобождается специальный флуоресцентный краситель. Далее оптическое устройство аппарата определяет плотность свечения комплексов «антиген-антитело» и выдаёт цифровой результат.

Иммуноферментный анализ – это качественный тест, поэтому он указывает только на наличие или отсутствие антител к хеликобактеру у пациента, но не дает возможность получить информацию о количестве вируса. ИФА точно определяет первичное инфицирование, что целесообразно использовать для скрининга лиц, контактирующих с больными хеликобактерной инфекцией. Для мониторинга терапии он будет неинформативен.

Иммуноферментный анализ

В заключении ИФА могут быть указаны следующие результаты теста:

  • отрицательный;
  • положительный;
  • сомнительный.

Серологический анализ

В основе серологического анализа лежит ИФА, только в данном случае будут обнаружены антитела всех типов (A, G, M) к вирусу и указано их количество.

ИФА на Helicobacter pylori IgG количественная достоверно верифицирует в крови антитела класса G, которые являются маркерами инфицирования микробами, а также антитела класса А. Последний тип антител вырабатывается во время острой фазы хеликобактерной инфекции и может говорить о наличии гастрита, язвы желудка, язвенного колита и других заболеваний пищеварительной системы.

Количественный серологический анализ выявляет также антитела к Helicobacter pylori не только IgG, но и IgM, по которым можно диагностировать раннее инфицирование. Иммуноглобулины класса М появляются на 7-й день после проникновения возбудителя в организм и сохраняются на протяжении двух недель.

Точность метода достаточно высокая, но зависит от состояния иммунитета пациента, например, у пожилых лиц, возможны ложноотрицательные результаты исследования.

Серологический тест на хеликобактер подходит как для первичной диагностики, так и для контроля лечения.

Расшифровку серологического анализа крови на Хеликобактер пилори выдают на следующий день. Заключение теста может быть таким:

  • антител A не выявлено;
  • IgA обнаруженный – концентрация от 1 до 13,5 МЕ/мл;
  • антител G не выявлено;
  • IgG в концентрации от 1 до 30 МЕ/мл.

Несмотря на высокую достоверность иммунологического и серологического анализов на хеликобактер пилори, поставить точный диагноз только по результатам этих исследований нельзя. Поэтому их дополняют другими методами диагностики хеликобактерной инфекции.

Как сдать анализ кала на бактерию Хеликобактер пилори

Более точными методами диагностики хеликобактерной инфекции являются тесты, которые выявляют Helicobacter pylori в кале. Для этого могут использоваться следующие анализы:

  • полимеразная цепная реакция;
  • посев материала;
  • иммунологическая диагностика.

Метод ПЦР

Специфика подготовки и сбора материала

Точность результатов исследования кала также зависит от качества подготовки к забору материала. Специалисты рекомендуют соблюдать следующие правила:

  • за месяц до сбора материала необходимо прекратить приём антибактериальных препаратов и спазмолитиков, если это возможно;
  • за три дня до теста следует исключить из рациона продукты, содержащие пигменты (препараты железа и висмута, виноград, красное вино, свёкла, кровянка, чёрная смородина и другие);
  • за день до исследования нельзя пользоваться ректальными свечами и ставить клизму;
  • на протяжении трёх дней до исследования нельзя употреблять овощи, содержащие грубую клетчатку (свёкла, капуста, редис, морковь, редька).

Правила сбора материала:

  • кал сдают в стерильном контейнере, который можно приобрести в аптеке;
  • для исследования лучше не брать фекалии из унитаза, поскольку в материал могут попасть хлор и средства бытовой химии;
  • для исследования понадобится 50 граммов кала, причем берут материал шпателем, который идёт в наборе с контейнером, из разных участков;
  • кал не должен содержать никаких примесей, в том числе и менструальной крови.

Собранный материал необходимо доставить в лабораторию в ближайшие 10 часов. Хранят контейнер с калом в холодильнике.

Метод ПЦР

Полимеразной цепной реакцией называется способ диагностики хеликобактерной инфекции, который заключается в увеличении минимальных концентраций определённых участков ДНК патогена в биологическом материале. Для этого используют специальные ферменты, благодаря которым удаётся увеличить количество копий генома до уровня верифицикации.

ПЦР на хеликобактер обладает высокой чувствительностью, поэтому микроб можно выявить даже тогда, когда в кале содержится всего 2-3 молекулы его генома. Достоверность метода достигает 95-98 %.

Культуральный анализ

Культуральный или бактериологический метод исследования – это «золотой стандарт» диагностики хеликобактерной инфекции. Материалом для анализа является биоптат слизистой пищеварительного тракта, который берут во время фиброэзофагогастродуоденоскопии (ФЭГДС). После забора биоптат высевают на питательную среду и ожидают появления колоний хеликобактера.

Культуральный анализ

Посев материала на хеликобактер – хоть и самый точный способ, но имеет свои недостатки, а именно:

  • для забора материала необходимо провести ФЭГДС, а это довольно неприятная инвазивная процедура;
  • биоптат нужно доставить в лабораторию сразу после забора, что не всегда удаётся;
  • анализ довольно длительный, поскольку результат будет готов минимум через 10 дней.

Иммунологический метод

Кал-тест на антиген к Хеликобактер пилори обладает высокой чувствительностью и точностью, что позволяет его использовать для диагностики первичного инфицирования и мониторинга лечения. Плюсами антигенного кал-теста являются:

  • неинвазивность;
  • высокая точность – не менее 95 %;
  • верификация активных и неактивных патогенов;
  • не требует специальной подготовки пациента;
  • можно делать как взрослым, так и детям.

Уреазный дыхательный тест

Принцип уреазного дыхательного теста состоит в том, что Helicobacter pylori в процессе своей жизнедеятельности способен выделять уреазу. Под воздействием этого фермента мочевина распадается на углекислый газ и аммиак. Углеводород выделяется из организма с дыханием, что даёт возможность определить его концентрацию в выдыхаемом воздухе. Пациенту дают выпить мочевину и делают замеры уровня углекислого газа до теста и во время него, после чего сравниваются показатели.

Подготовка и техника проведения

Подготовка к тесту заключается в следующем:

  • за две недели до исследования прерывают приём антибиотиков, к которым чувствителен хеликобактер;
  • за два дня до теста исключают из рациона капусту, бобовые, редьку, редис и другие продукты, вызывающие метеоризм;
  • в день проведения тестирования запрещается жевать жевательную резинку и курить сигареты;
  • утром перед исследованием должен быть лёгкий завтрак;
  • пить нельзя в течение часа перед анализом.

Техника уреазного дыхательного теста:

  • замеряют с помощью трубки, присоединённой к аппарату, уровень уреазы в выдыхаемом воздухе до приёма мочевины с углеводородом, меченным изотопами;
  • дают выпить пациенту раствор мочевины;
  • через 15 минут снова замеряют уровень фермента.

Расшифровка результатов

Низкий уровень углекислого газа – это от 1,5 до 5,5. Результат говорит о том, что микроб находится в неактивной фазе.

Если полученный показатель резко превышает норму углекислого газа в выдыхаемом воздухе после приёма раствора мочевины, то это значит, что у пациента в пищеварительном тракте активно размножается хеликобактер.

Уреазный дыхательный тест

Другие методы диагностики

Для диагностики хеликобактерной инфекции также могут использоваться и другие методы, такие как:

  • гистология;
  • цитология;
  • экспресс-тесты.

Гистология

Для этого анализа используют кусочек ткани, взятой во время ФЭГДС, который изучают под микроскопом. С помощью гистологии можно оценить строение клеток и выраженность воспалительного процесса. Хеликобактер при гистологии верифицируют путём применения моноклональных иммуноглобулинов.

Цитология

Для цитологии понадобятся мазки-отпечатки тканей, которые были получены при ФЭГДС. Стекла с мазками фиксируют, окрашивают и высушивают, после чего осматривают под многократным увеличением микроскопа. С помощью цитологии можно увидеть непосредственно сам хеликобактер, определить его концентрацию и форму.

Расшифровать цитологию можно следующим образом:

  • отрицательный результат – означает, что микроба в мазке нет;
  • + – 20 микробных тел в одном поле зрения;
  • ++ – от 20 до 40 микробных тел в одном поле зрения;
  • +++ – больше 40 микробных тел в одном поле зрения.

Гистология

Быстрый уреазный тест

Материалом для теста является мазок слизистой пищеварительного тракта, полученный при ФЭГДС. Затем мазок погружают в двухпроцентный раствор мочевины на 25 минут, который содержит индикатор. Последний изменяет цвет от жёлтого до малинового в зависимости от рН, которое меняется при выделении уреазы мазком.

Какие анализы на Хеликобактер пилори точнее

По праву самыми достоверными и чувствительными методами определения хеликобактер пилори можно назвать следующие тесты:

  • ПЦР кала, точность и чувствительность которого составляет 95-98 %;
  • цитологический, поскольку этот способ позволяет увидеть под микроскопом саму бактерию;
  • бактериологический – является «золотым стандартом» диагностики хеликобактерной инфекции.

Другие методы диагностики, такие как ИФА или уреазный тест, требуют проведения дополнительных исследований.

Через какой срок проводится повторное обследование

Лечение хеликобактера занимает от 7 до 14 дней. Но контрольные тесты проводят не всегда сразу по окончанию эрредикации, поскольку антитела к хеликобактеру и его геном могут ещё обнаруживаться в материалах некоторое время. Поэтому во избежание неправильной интерпретации полученных результатов необходимо подождать от 1 до 6 недель и только потом провести повторные анализы.

Сроки выполнения повторных тестов на хеликобактер зависят от вида исследования, а именно:

  • уреазный дыхательный тест проводят через 1-1,5 недели после окончания курса антибиотиков;
  • ИФА на антитела к хеликобактеру выполняют через 1,5 недели после окончания курса терапии;
  • ПЦР-исследование повторяют через 4 недели после лечения.

Хеликобактер пилори – это маленькая бактерия, вызывающая большие проблемы с органами пищеварительной системы. Поэтому обратитесь к специалисту и узнайте, не паразитирует ли в вашем желудке этот коварный микроб.

Ссылка на основную публикацию